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生命科学学院易文朱强团队开发高效符号和判定中心岩藻糖基化的新战略

发布日期: 2024-10-08 19:44:47 来源:ELISA试剂盒



  残基上。很多研讨标明该润饰在细胞信号传导、细胞粘附、抗体依赖性细胞毒性()以及肿瘤发生等生理过程中起着很重要的效果。此外,特定肿瘤标志物蛋白上的中心岩藻糖基化润饰水平也可作为肿瘤早筛的重要依据。但是现在中心岩藻糖基化的的深度探求和广泛使用。因而,开展一种高活络度以及高特异性的符号、检测和富集

  研讨团队运用线虫来历的糖基转移酶GALT-1作为酶符号办法的东西酶,规划并合成了带有叠氮基团的底物UDP-Gal-6-N3,并结合点击化学反响将荧光基团或许生物素连接到中心岩藻糖基化润饰的蛋白上,完成对中心岩藻糖基化蛋白的精准符号(图1A)。团队首要经过体外糖符号反响结合质谱剖析证明了GALT-1能催化底物UDP-Gal-6-N3连接到中心岩藻糖基化润饰上(图1B)。该办法也可对细胞裂解液中的中心岩藻糖基化润饰蛋白(EGFR,AFP和E-Cad)进行高效符号,展现出较高的信噪比(图1C)。此外,该符号战略还能对活细胞外表的中心岩藻糖基化蛋白符号及荧光成像。敲低细胞内的中心岩藻糖基转移酶FUT8显着降低了该办法对中心岩藻糖基化蛋白的符号,回补表达FUT8能彻底康复符号信号,标明GALT-1介导的中心岩藻糖基化符号具有高度特异性(图1D和1E)。最终,团队结合ELISA的办法对比了临床肝癌患者和正常人血清中IgG蛋白含量以及IgG上的中心岩藻糖基化水平,发现IgG蛋白的中心岩藻糖基化水平在肝癌患者中十分显着升高,而总的IgG蛋白含量没改动(图1F和1G)。ROC曲线剖析标明IgG蛋白的中心岩藻糖基化可作为肝癌前期确诊更为理想的标志物(图1H)。

  总归,该研讨开发了一种活络且高效的化学酶联符号战略来检测中心岩藻糖基化。该战略能对糖肽、蛋白质、细胞裂解物、活细胞和血清中的中心岩藻糖基化蛋白进行高效且精准的符号、成像以及质谱检测,不只有助于推动对中心岩藻糖基化生物学功用的深化探求,而且为临床肿瘤的前期确诊供给了有力的化学东西。

  该研讨的榜首通讯单位是浙江大学生命科学学院。百人方案研讨员朱强为论文的榜首作者,易文教授和美国科学院院士Linda C. Hsieh-Wilson教授为论文的一起通讯作者。这项作业得到了国家自然科学基金委杰出青年基金项目、面上项目和青年项目的赞助。

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