发布日期： 2024-07-03 05:06:23 来源：ELISA试剂盒
布鲁菌是一类乙类传染病的人畜共患病原菌，容易感染动物，人类通过接触带此菌的动物或食用病畜及其制品而感染，从而引起布鲁菌病。布鲁菌病的主要临床表现为程度轻重不一的发热、多汗、全身乏力及关节痛等[1]。布鲁菌需要的营养条件苛刻，在血平板生长缓慢，不易培养，导致实验室诊断布鲁菌病较难。本案例通过微生物培养技术结合患者的接触史等，诊断一例布鲁菌引起的血流感染。
患者，男性，28岁，轻微关节痛，无明显发热，5月31日以健康查体为因就诊于我院急诊科，分别执行厌氧和需氧血培养，并未进行其他辅助检查，需氧瓶培养69h54min后报阳，而厌氧瓶并没有报阳，需氧瓶的血涂片经革兰氏染色后，未发现细菌（图1和图2）。
于是按照我们科微生物室血培养阳性处理流程查看生长曲线，曲线确实呈现明显的生长趋势（图3），初步考虑血培养是线
再次重新混匀血培养瓶，涂两张血涂片，分别进行革兰氏染色和亚甲蓝染色，镜下发现革兰阴性短小球杆菌（图4和图5箭头所指），呈“沙滩状”，成堆排列，着色较淡，遂向临床报告危急值。
血平板培养24 h后，有针尖状细小菌落生长（图6），通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定为布鲁菌属（图7），氧化酶阳性（图8），挑取菌落直接涂片革兰染色，镜下可见革兰氏阴性短小球杆菌，呈现“细沙状”（图9）。
我们立即联系患者，沟通其家里有无饲养牛羊等家畜、与布鲁菌是否有密切接触史等，患者答复其为宁夏人，家里从事养殖业（牛）并且家里近期有人感染布鲁菌病。
布鲁菌为革兰阴性球杆菌，分散存在，呈细沙状，专性需氧，初次分离培养需要5%～10% CO2，2～3天出现菌落，4～5天形成2～3 mm无色、半透明的圆形菌落，氧化酶和触酶均阳性[2]。
在此案例中，我们得知布鲁菌菌落细小、生长较慢、营养要求比较高，培养时间比较久。如果患者有典型的发热等临床症状和牛羊等家畜接触史，高度怀疑布鲁菌感染而微生物培养没有检测出病原菌，应该要延长培养时间，对可疑的病原菌有明确的目的性的培养和鉴定，这样做才能够提高检出率,从而更好地指导临床合理用药。布鲁菌是兼性胞内寄生菌，主要致病物质有荚膜、内毒素和侵袭性酶，能感染家畜和动物，也能够最终靠皮肤、消化道和呼吸道等传播给人，引起人布鲁菌病。而在城市中主要是通过食用病畜的奶制品或肉制品进行传播，人与人之间的传播较少。大多数青壮年男性的人群易感布鲁菌，其中感染的高危人群主要是农民、牧民、屠夫等，实验室技术人员在培养布鲁菌时不注意防护也会感染[1]。本病例就是患者与牛或感染布鲁菌的人员有密切接触史，从而感染布鲁菌。
布鲁菌病的主要临床表现为反复发热、多汗、关节痛、全身乏力，可引起菌血症、淋巴结肿大、肝损伤、骨关节损伤、流产、中枢神经系统受损等。本病例以右踝轻微关节痛为主要症状，加上无明显发热，临床医生对其认识不足易误诊和漏诊，但结合患者既往史、流行病学史，再结合血培养结果，不难诊断布鲁菌病。
布鲁菌病实验室诊断包括一般实验室检查（血常规等）、细菌培养、血清学检测、分子生物学检测以及心电图和X线]。其中血清学检测主要是血清凝集试验，由于该病临床表现的多样性、细菌培养的低阳性率，血清学检测在诊断中发挥重要的作用。本病例做的实验室检查较少，主要是通过细菌培养出布鲁菌来诊断布鲁菌病。
布鲁菌需要的营养条件较高，培养时间比较久，临床实验室一般不作为常规药敏试验检测。由于布鲁菌是胞内寄生菌，临床治疗布鲁菌病需要渗透力强的药物，一般都会采用多西环素与庆大霉素或者多西环素与利福平等联合治疗，治疗原则是早期、联合、足量、足疗程给药，必要时延长疗程，以避免复发及慢性化，治疗的推荐抗菌药物及方案[1]，见表1。
布鲁菌对人的致病力较强，免疫接种和病畜管理是控制布鲁菌病的主要预防的方法。牧场、屠宰场工作人员及相关职业的人群应接受免疫接种，做好养殖场的粪、水管理，防止病畜及其排泄物污染水源。同时人畜进行分居，奶制品应经过巴氏消毒法处理，家畜肉类也经煮熟后才可进食。而检验科等实验室技术人员应提高警惕，一定要做好个人防护。
布鲁菌病多发于与牛羊等家畜密切接触的青壮年，北方年发病率高于南方，南方省份发病率有增长趋势，本例患者是在北方感染后在南方确诊，南方省份发病率增长趋势是否与北方人口南下有关值得进一步关注。
布鲁菌需要的营养条件苛刻，在血平板生长缓慢，不易培养，导致实验室诊断困难，而本地区的人从事畜牧业少，感染后潜伏期长，症状不明显，临床医生在本病的诊断中缺乏临床经验，容易漏诊。因此，我们作为检验者来说，要有足够的临床理论知识，不断地丰富自己的临床经验，更重要的是要结合临床，多与临床和患者沟通，同时也要结合患者的流行病学，了解患者的临床症状、职业等有关的资料，对于布鲁菌病的病原学诊断有着及其重要的作用，特别是对发热患者应及时进行血培养检查，高度怀疑布鲁菌感染应适当延长培养时间等，对布鲁菌病的早期诊断和合理指导用药有重要意义，同时增强畜牧业相关职业的高危人群防护意识,防止布鲁菌的暴发流行。
[1]布鲁菌病诊疗专家共识.中华传染病杂志[J],2017年12月第35卷第12期
[2]宋江勤，徐湖波.一例布鲁菌病的病原学诊断.中华实验和临床感染病杂志[J], 2013年12月第7卷第6期
[3]张海霞，杜刚等.布鲁菌病确定诊出的病例1例报道.检验医学2019年10月34卷第10期