发布日期: 2024-09-17 20:46:35 来源:新闻中心
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PCR技能,即聚合酶链反响(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)树立的。这项技能可在试管内的经数小时反响就将特定的DNA片段扩增数百万倍,这种敏捷获取很多单一核酸片段的技能在分子生物学研讨中具有无足轻重的含义,极大地推动了生命科学的研讨进展。它不仅是DNA剖析常用的技能,并且在DNA重组与表达、基因结构剖析和功用检测中具有极端严重的使用价值。
PCR能够被认为是与发生在细胞内的DNA仿制进程类似的技能,其成果都是以本来的DNA为模板发生新的互补DNA片段。细胞中DNA的仿制是一个很杂乱的进程。参加仿制的有多种要素。PCR是在试管中进行的DNA仿制反响,根底原理与细胞内DNA仿制类似,但反响系统相对较简略。
PCR由变性--退火--延伸三个根本反响进程构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至94℃左右一段时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增构成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反响做准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板--引物结合物在Taq酶的效果下,以dNTP为反响质料,靶序列为模板,按碱基配对与半保存仿制原理,组成一条新的与模板DNA 链互补的半保存仿制链。
重复循环变性--退火--延伸三进程,就可取得更多的“半保存仿制链,并且这种新链又可成为下次循环的模板。每完结一个循环需2~4分钟, 2~3小时就能将待扩意图基因扩增扩大几百万倍。
7.试验结束后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;
8.试剂盒里一切物品应视为污染物对待,并依照《微生物生物医学试验室生物安全公例》进行处理。
主营产品:ELISA试剂盒,PCR试剂盒,细胞,抗体,菌种,生化试剂,规范品,质粒,培养基