发布日期： 2024-02-24 14:00:47 来源：新闻中心
依照2015年版《我国药典》高效液相色谱法[2]，检测波长254nm，别离精细量取空白溶液、对照品溶液、供试品溶液和体系适用性溶液各50μl，注入液相色谱仪，记载色谱图，体系适用性图谱中的EDTA-Cu的色谱峰的理论板数不低于2000。
参阅EDTA-Cu的DAD光谱扫描图谱及《HPLC法测定肝素钠原猜中EDTA-2Na的残留》文献检测波长状况，将本品的检测波长设定为254nm。
2.2.3供试品溶液制备取本品约1.6g，置50ml纳氏比色管中，精细称定，加水8ml使溶解，滴加浓硫酸1ml，超声2分钟，加2%硫酸铜溶液1ml，室温放置1小时，即得。
2.2.4体系适用性溶液制备精细称取乙二胺四乙酸二钠30mg，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精细量取上述溶液1.0ml置50ml纳氏比色管中，加水7ml，滴加浓硫酸1 ml，超声脱气2分钟，加2%硫酸铜溶液1ml，室温放置1小时，即得。
无水碳酸钠为药用辅料，为本厂许多粉针制剂的重要辅料，如头孢他啶、盐酸头孢替安等，为便于质量操控，本厂开发了粗品精制制备无水碳酸钠组成工艺，为避免无水碳酸钠中残留的金属离子与配伍的主药产生反响，影响药品质量，在制备无水碳酸钠时，添加了少数的金属络合剂乙二胺四乙酸二钠（EDTA），进步药品稳定性。
在选定的EDTA含量测定条件下，制造供试品溶液，在室温下放置，于第0min、20min、40min、60min、80min进样检测EDTA-Cu的峰面积。成果见表1：
residues无水碳酸钠为药用辅料为本厂许多粉针制剂的重要辅料如头孢他啶盐酸头孢替安等为便于质量操控本厂开发了粗品精制制备无水碳酸钠组成工艺为避免无水碳酸钠中残留的金属离子与配伍的主药产生反响影响药品质量在制备无水碳酸钠时添加了少数的金属络合剂乙二胺四乙酸二钠edta进步药品稳定性
1.2资料硫酸（剖析纯，哈尔滨试剂化工厂）；EDTA-2Na（剖析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；硫酸铜（剖析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；无水碳酸钠（打针级，批号：20170401、20170501、20170502，哈药集团制药总厂）。水为克己纯化水。
2.2.1空白溶液的制备取纯化水8ml，置50ml纳氏比色管中，滴加浓硫酸1ml，超声2min，加2%硫酸铜溶液1ml，室温放置1小时，即得。
摘要】意图：树立无水碳酸钠中EDTA-2Na的残留测定办法。办法：色谱柱：Inertsil ODS-3，250mm×4.6mm，5μ；活动相：0.025mol/L硫酸铵溶液（用硫酸调理pH值至3.0）；检测波长：254nm；流速：1.0ml/min；进样量：50μl。成果：EDTA-2Na在0.03～7.49μg/ml浓度范围内具有十分杰出的线%。定论：本法测定无水碳酸钠中EDTA-2Na具有十分杰出的专特点、线性、重复性和精确度，适用于EDTA-2Na的检测。
本品EDTA含量测定办法，经办法学验证可知，本办法可以精确定量测定碳酸钠中EDTA含量；EDTA含量极限参阅国家食品药品监督管理总局药审中心的电子刊物《关于静脉给药制剂中运用乙二胺四乙酸二钠有关状况调研及剖析》，规定为本品含EDTA不得过0.004%，精制工艺完全能符合该极限要求。
1.要辉，纪万里，白育庭. HPLC法测定肝素钠原猜中EDTA-2Na的残留.[J]我国民族民间医药，2015，24（16）：28-29
2.国家药典委员会.中华人民共和国药典四部[M].北京：我国医药科技出版社，2015.
2.2.2对照品溶液的制备精细称取乙二胺四乙酸二钠30mg，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精细量取上述溶液1.0ml，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀；精细量取上述溶液1.0ml，置50ml纳氏比色管中，加水7ml，滴加浓硫酸1 ml，超声脱气2分钟，加2%硫酸铜溶液1ml，室温放置1小时，即得。
别离于不同时刻、由不同剖析人员测定精细度，在EDTA含量测定范围内，制备供试品溶液，用至少测定6次的成果进行点评，核算含量及其相对标准偏差，测定依据成果得出日内及日间RSD均小于4.0%，中心精细度杰出。
经过将色谱条件中活动相的柱温、缓冲盐浓度、pH、流速、检测波长及色谱柱填料进行细小变化，调查该色谱条件的耐用性。依据成果得出色谱条件柱温30℃±5℃，缓冲盐浓度±0.005 mol/L，pH3.0±0.2，流速1.0±0.2 ml/min，检测波长254±3nm，及更换为ODS-2色谱柱均能满意体系适用性要求，EDTA含量均不受影响.
精细称取乙二胺四乙酸二钠（EDTA）（含量99 %）30.92mg，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精细量取上述溶液1.0ml，置10ml量瓶中，加水定量稀释至刻度，摇匀，量取0.8 ml、1.0ml、1.2ml各3份，别离置9个加1.6 g碳酸钠的50ml纳氏比色管中，别离加水7.2ml、7.0ml、6.8ml，溶解，滴加浓硫酸1.0 ml，超声脱气2分钟，加2%硫酸铜溶液1ml，室温放置1小时，作为收回率实验溶液；另取供试品溶液和对照品溶液各一份，别离取50μl注入液相色谱仪，记载色谱图，按外标法以峰面积核算供试品中乙二胺四乙酸二钠（EDTA）的收回量，9份供试品均匀收回率为98.02%，RSD为0.82%，收回率较好。
精细称取乙二胺四乙酸二钠（EDTA）（含量99 %）31.53mg，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精细量取上述溶液1.0 ml，置10ml量瓶中，加水定量稀释至刻度，摇匀，精细量取上述溶液0.1 ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.7ml、0.8ml、0.9ml、1.0ml、1.2ml各1份，别离加水7.9 ml、7.8ml、7.6ml、7.4ml、7.3ml、7.2ml、7.1ml、7.0ml、6.8ml，别离置50ml纳氏比色管中，摇匀，滴加浓硫酸1.0 ml，超声脱气2分钟，加2%硫酸铜溶液1ml，室温放置1小时，作为线μl注入液相色谱仪，记载色谱图，得到线，依据成果得出EDTA-2Na浓度在0.03~7.49μg/ml，相当于EDTA在碳酸钠里的残留量在0.000019%~0.00468%范围内与峰面积呈杰出线性关系。
因为乙二胺四乙酸二钠（EDTA）可与钙离子结组成可溶的络合物引起钙的削减，静脉制剂中运用乙二胺四乙酸二钠（EDTA）会导致血钙下降，因而，要添加EDTA查看项，注重和严控无水碳酸钠中乙二胺四乙酸二钠（EDTA）的用量。
现在，乙二胺四乙酸二钠（EDTA）的查看办法有比色法、滴定法、离子色谱法和高效液相色谱法[1]等，本厂归纳挑选了多种办法，终究挑选专特点强的高效液相色谱法检测乙二胺四乙酸二钠（EDTA）的金属络合物EDTA-Cu，然后直接对EDTA进行测定。考虑到碳酸钠与硫酸铜在水溶液中会构成碱式碳酸铜白色沉积，搅扰测定，因而在络合前参加硫酸溶液，将碳酸钠转变成硫酸钠后，再经过查验测验乙二胺四乙酸二钠（EDTA）的金属络合物EDTA-Cu对碳酸钠中的EDTA残留量进行测定。