ELISA试剂盒：选对品牌用对品牌让您的实验效率事半功倍！

  ELISA试剂盒深受广大科研工作者的喜爱。而且市面上的ELISA试剂盒数不胜数，让大家都选择的时候都比较纠结。到底如何抉择试剂盒呢？怎么样才可以不被纷扰世道的假的试剂盒迷惑双眼呢？选什么样的试剂盒才能性价比高呢？

  品牌试剂盒随便一个价钱都是要一千块以上，如果选错了试剂盒，轻则损失一笔科研经费，重则毁掉整个实验课题，再重则影响科研事业的发展，这个锅您能背么？不背

  市面上的ELISA Kit质量良莠不齐，想要挑选到合适的试剂盒还真不是一件很容易的事情。不背锅，咱就坐下来，看看如何擦亮双眼，找对的，不找贵的（当然便宜的更不能找）；找好的，不找差的（怎么样才知道好差呢？）

  下面小编“借您借您一双慧眼吧”跟大家一起把这纷扰看的清清楚楚、明明白白、真真切切！（小板凳搬过来，小编要分享经验咯）

  1查找待测样本的蛋白浓度：能够最终靠美国国立生物技术信息中心（NCBI）的文献，Universal Protein（uniprot）上给出的蛋白表达量参考值来比较ELISA试剂盒中给出的样本值与报道值是否一致；

  2试剂盒的应用种属、检测样本的种类：除试剂盒特别说明外，一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有：血清和血浆（不同抗凝剂），细胞上清，和细胞裂解液，试剂盒中不同样本的稀释液不混用；

  3试剂盒的检验测试范围：也就是标曲范围，特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内，对于浓度很高的样本，可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。

  a.稀释线性一般指样本稀释线性，是将样本梯度稀释下来，看各稀释梯度浓度是否成线性；参考样本稀释线性可以再一次进行选择样本的最佳稀释倍数；

  b.稀释线性也有做加标稀释线性的情况，加标稀释线性是将标准品加入样本中测定加入的标准品浓度测定是否准确；同样也是确定待测样本稀释倍数的参考指标。一般线试剂盒的其它指标：

  灵敏度：试剂盒能够检测到的样本最低浓度的能力，如果待检指标含量很低，要选择高灵敏度的ELISA试剂盒；

  6试剂盒的有效期：试剂盒的有效期一般是半年，样本准备时间需要考虑到试剂盒的有效期。

  质量是品牌的第一生产力，但在“通蔚生物”眼中，服务高于一切，服务真的是很重要的，尤其是科研领域选产品，产品的售前、售后技术服务及时，课题进展及时，科研结果及时报送，为科研助力就多了一分，时间就是我们科研工作者的成本，并且是大于一切的成本，“通蔚生物”跟时间赛跑，争取为您的科研事业多助力，助好力。

  选对ELISA Kit只是第一步，要想获得理想的实验结果，还需掌握使用技巧，所以用对了，才能事半功倍！

  通蔚生物ELISA试剂盒研发团队，历经多年的研发实践，总结了ELISA Kit使用技巧，与您分享。

  2样本的准备：尽量使用新鲜样本，不使用有溶血，被细菌污染、标本保存时间过长和标本凝固不全的样本。ELISA检测宜采集新鲜标本，如不能立即测定，5天之内应4℃保存，对于1周后检测的样本应低温冻存；做好分装，长时间冻存的样本避免反复冻融。

  4预包被的酶标板条和各试剂组份需要室温平衡30 min以上，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需温度，预防后续实验中由于孵育温度或是时间不够充分，而将一些弱阳性样本不能检出。

  5待测样本加样：待检样本过多时，建议分批操作；需要稀释的样本提前做好稀释，注意选对合适稀释液；控制好加样时间，避免加样费时过长造成误差；注意加样角度，垂直加入孔底，莫接触孔壁,做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。

  6温育和洗板：温育时间和温度一般根据试剂盒的说明书做出合理的选择。温育时能够使用水浴或者湿盒孵育,避免“边缘效应”。①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；②洗板机洗板时应常常检验核查冲洗头是否通畅。

  7显色：一般是以双组份（A：过氧化脲工作液，B液：TMB工作液）为底物显色液。反应条件为37℃避光孵育15-30min

  8读数和数据分析：终止后读取结果尽量在15min内完成，读取OD值时酶标仪需先预热15～30 min再进行。数据分析一般用四参数和直线拟合法，选择哪种拟合方式，可以依据标曲的相关系数（R2）来确定，R2一般大于0.95可用。大于0.99是最佳。