ELISA操作过程

  将所用抗原用包被稀释液稀释到恰当浓度(一般所需抗原包被量为每孔20-200μg),每孔抗原参加100μl, 置37℃,4h,或4℃,24h;弃去孔中液体.(为防止蒸腾,板上应加盖或将板平放在底部有湿纱布的金属湿盒中)

  5%小牛血清置37℃关闭40min.关闭时将关闭液加满各反响孔,并去除各孔中的气泡,关闭完毕后用洗刷液满孔洗刷3遍,每遍3min.

  洗刷办法:吸干孔内反响液,将洗刷液注满板孔,放置2min略作摇摆,吸干孔内液,倾去液体后在吸水纸上拍干。洗刷次数3次

  检测时一般都会选用1:50-1:400的稀释度, 应选用较大稀释体积进行,一般确保样品汲取量20μl.

  将稀释好的样品参加酶标反响孔中,每样品至少加双孔, 每孔100μl,置于37℃,40-60min.用洗刷液满孔洗刷3遍,每遍3min.

  酶标抗体: 依据酶结合物供给商供给的参阅作业稀释度进行. 37℃,30-60min之间.短于30min往往成果不稳定.每孔加100μl.洗刷同前。

  底物参加量:每孔100μl,置37℃避光放置3-5分钟,参加停止液显色.

  OPD显色后选用492nm波长,TMB反响产品检测需求450nm波长.检测时一定要首要进行空白孔体系调零.用测定标本孔的吸收值与一组阴性标本测定孔平均值的比值(P/N)表明,当P/N大于2时作为抗体的效价.(数值的巨细依详细查验测验要求而定.)

  我买了中杉金桥超敏二步法免疫组化试剂盒，阐明书上没写要加关闭液，能够不关闭吗，仍是别的买山羊血清？