发布日期: 2024-02-06 11:58:47 来源:HPLC法检测
酶联吸附法(ELISA)的优点包括:1.高灵敏度:ELISA可以检测出微量的抗原或,它的灵敏度通常比其他学更高。2.高特:ELISA仅与特定的抗原或结合,因此不易受到其他的,具有较高的特。3.快速:ELISA操作简单便捷、快速,可以在极短的时间内结果.4.易操作:ELISA实验操作相对简单,易于化和自动化,因此适合于大规模样品的检测。5.应用场景范围广:ELISA能够适用于检测多种生物分子,如蛋白质、多肽、等,因此在医学、生物领域大范围的应用。6.无放射性核素污染:与放射测定法相比,ELISA不需要用放射性核素,因此更为安全、环保。总之,ELISA是一种高灵敏度、高特、快速、易操作的学技术,具有广泛的应用前景。
酶联吸附法(ELISA)是一种灵敏、特异的学技术,常用于医学、生物领域中的抗原或检测。其操作步骤如下:1.包被:将抗原或与酶结合,形成酶标抗原或,并固定在固相载体上。2.洗涤:去除未结合的和杂质。3.封闭:加入封闭液,封闭固相载体上未结合的位点,以非特结合。4.洗涤:去除未结合的封闭液和杂质。5.加样:加入待检测的样本,使其与固相载体上的抗原或结合。6.洗涤:去除未结合的样本和杂质。7.加入酶标:使固相载体上的抗原或与酶标结合,将抗原或间接标记上酶。8.洗涤:去除未结合的酶标和杂质。9.显色:加入底物,使酶催化底物生成有色产物,根据颜色反应的程度进行抗原或的定性或定量检测。必须要格外注意的是,具体的操作步骤可能因实验设计、试剂品牌等不同而有所差异。在进行ELISA实验时,应严格按照试剂盒说明书和实验指导手册做相关操作,控制好实验条件和操作步骤,以实验结果的准确性和可靠性。
酶联吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种灵敏、特异的学技术,用于检测抗原或的存在。其基础原理是将抗原或与酶结合,形成酶标抗原或,保留其活性,同时又保留酶的活性。然后将酶标抗原或与固相载体表面结合,形成酶-抗原-复合物通过底物显色反应,根据颜色变化来检测抗原或的存在。ELISA具有高灵敏度、高特、快速、易操作等优点,在医学、生物领域广泛应用。
双夹心 本法大多数都用在检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病(IBDV)的双夹心ELISA为例介绍本法的操作程序。 ① 加包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干 ② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干 ③ 加酶标 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干 ④ 加底物液→ 37℃ 15分钟,加终止液 ⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。 双夹心ELISA 此法与双夹心ELISA的主要不同之处在于:它是采用酶标抗检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种,还可试验的性。此法的基本程序为: ① 加(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干 ② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干 ③ 加用非同种动物生产的特(Ab-2)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干 ④ 加入酶标抗Ab-2(AB-3)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干 ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液 ⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。 竞争ELISA 此法大多数都用在测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射测定。其基本程序为: ① 包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干 ② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干 ③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液 ④ 用ELISA检测仪测定OD值。