发布日期: 2023-10-19 13:40:23 来源:GC法检测
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竞赛法ELISA(也称按捺或关闭法ELISA)经过定量某种样品剖析物对估计信号的搅扰,来测定该剖析物在样品中的含量。
抗原抗体的结合是一个可逆的反响:A+B ⇋AB(A表明抗体,B表明抗原,AB表明抗原抗体结合物)。当反响到达平衡时,解离常数Kd=[A][B]/[AB],[AB]表明反响平衡时抗原抗体结合物的浓度,[A]表明反响平衡时游离抗体的浓度,[B]表明反响平衡时游离抗原的浓度。
① 当反响系统中抗体很少,而抗原过量时,反响平衡后[AB]>
[A];② 当反响系统中抗原量很少,而抗体过量时,反响到达平衡后[AB]
③ 当反响系统中抗原抗体的量刚好合当令,反响到达平衡后处于半饱和状态,此刻[AB]=[A],则Kd=[A][B]/[AB]=[B]。
在半饱和状态下,假如抗体的浓度很低,反响耗费的抗原很少,则反响后游离的抗原浓度[B]约等于总的抗原浓度[B]总,此刻Kd=[B]≈[B]总。因而,只要在抗体浓度较低的情况下,找到可以在反响平衡后到达半饱和状态的抗原浓度[B]总,便可以取得解离常数。
竞赛法的根本进程是挑选少数的靶点分子和可以占有该靶点分子80%结合位点的符号的信号分子,参加梯度稀释的待测样品,将三者进行混合反响后检测靶点分子-信号分子复合物的信号值,制作待测样品浓度和信号的剂量曲线,该曲线往往是反S型,得到IC50值,IC50越小,阐明该待测样品和靶点分子的亲和力越强。
-- 无需样品处理,可检测原油或不纯的样品-- 重复性好:重复样品和剖析之间的差异更小
抗体,蛋白,多肽,化合物小分子等* 缓冲液:PBS, HEPPS等不含有机试剂,不含Tris,甘油,咪唑,海藻糖,EDTA或DDT;
--供给真实的一站式服务:供给从亲和力测定服务,到分子互作研讨的一体化解决方案
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