豚鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA试剂盒

  2. 灵敏度高：因为酶的扩大效果，使得试验的灵敏度大大，可以检测出微量的抗原或。

  3. 操作简洁：ELISA试验操作相对简略，简单，适合于大规模样本检测。

  1. ：运用不含热原和内的试管，操作中防止任何细胞，搜集血液后，3000 转离心 10 分钟将和红细胞敏捷小心肠别离。

  2. ：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

  4. 安排匀浆：将安排参加适量盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

  5. 保存：假如样本搜集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，防止重复冻融，在室温下解 冻并保证样品均匀地充沛冻结。

  自从Engvall和Perlman(1971）报导树立酶联吸附试验（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA）以来，因为ELISA具有快速、、简洁、易于化等长处，使其敏捷的开展和广泛运用。虽然前期的ELISA因为特不行高而阻碍了其在实践中运用的脚步，但随着的一向在改善、资料的一向更新，尤其是选用基因工程制备包被抗原，选用针对某一抗原表位的单克隆进行ELISA试验，都大大了ELISA的特，加之电脑化程度的ELISA检测仪的运用，使ELISA更为简洁有用和化，然后使其成为大范围的运用的检测之一。现在ELISA已被大范围的运用于多种和等的确诊。在动物检疫方面，ELISA在猪传染性胃肠炎、牛副结核病、牛传染性鼻气管炎、猪伪、蓝舌病等的确诊中已为广泛选用的。

  试剂盒选用双一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被相关目标的的包被微孔中，顺次参加标本、品、HRP符号的检测，经过温育并洗刷。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的效果下转化成终的。色彩的深浅和样品中的相关目标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），核算样品浓度。

  8)中止反响:参加中止溶液中止酶的反响(在某些类型的ELISA中需求)。

  9) 读数:运用光谱光度计测定每个孔的吸光度(通常是在特定波长下)，吸光度

  点ELISA：与惯例的微量板ELISA比较，Dot-ELISA具有简洁、节约抗原等长处，并且成果可长时间保存；但其也有缺乏，首要是在成果断定上比较片面，特不行高级。该的首要操作程序为：⑴载体膜的预处理及抗原包被取纤维素膜用蒸馏水浸泡后，稍加枯燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后参加圈中，置37℃使纤维素膜枯燥。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40－53个样品，每个压圈可加抗原液1－20μl。⑵ 关闭将纤维素膜置于关闭液中，37℃感作15－30分钟。关闭液多选用含有正常动物、pH7.2或pH7.4的PBS。⑶ 加被检可直接在抗原圈上加，也可剪下抗原圈、置于微量板孔中，再参加必定量适度稀释的待检，37℃反响一段时间，用洗刷液洗三次，每次1－3分钟。洗刷液一般为必定浓度的PBS-Tween溶液。⑷ 加酶标，37℃反响一段时间后，用洗刷液洗三次。⑸显色参加新鲜制造的底物液，37℃反响一段时间后，去掉底物液，加蒸馏水洗刷中止反响。⑹ 成果断定以阳性、阴恶作为对照，膜片呈现深棕赤色点者为阳性反响，不然为阴性反响。

  1.：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应防止重复冻融。

  2.：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本收集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应防止重复冻融。

  3.细胞物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应防止重复冻融。 (注：标本溶血会影响**检测成果，因而溶血标本不宜进行此项检测。)

  依据试剂盒供给的品浓度及对应的OD值，利用品制作的曲线，核算待测样品的浓度。一般都会选用拟合曲线法或直线回归法进行数据处理，经过核算待测样品的浓度。

  试剂盒仅供研讨运用，不得用于临床试验或生物体试验，不然所发生的全部成果，由试验者承当， 本公司概不负责。

  严厉依照说明书操作，不同批号不行交流运用，试验者违背说明书操作，成果由试验者承当。

  直接ELISA：本法大多数都用在检测。（DVH）的ELISA为例，直接ELISA的操作程序如下。⑴ 资料① 包被液、洗刷液、保温液、底物液、中止液；② DVH包被抗原、酶标抗、阴性及阳性DVH参阅；待检鸭；③ ELISA检测仪、加样器、聚微量板。⑵ 过程① 加抗原包被 → 4℃过夜，洗刷三次、抛干② 加待检 → 37℃ 2小时，洗刷三次、抛干③ 加酶标 → 37℃ 2小时，洗刷三次、抛干④ 加底物液→ 37℃ 30分钟，加中止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值，并核算出P/N比值。⑶ 成果断定已知阳性与已知阴性的比值（P/N）≥2.1，并且已知阳性的OD值≥0.4；在上述条件建立的情况下，假如待检与已知阴性的比值（P/N）≥2.1，并且待检的OD值≥0.4，则判为阳性，不然判为阴性。