发布日期： 2024-06-27 07:45:19 来源：ELISA试剂盒
此试剂盒可用于人血清、血浆和脑脊液中抗莱姆氏14kDa和OspC抗原的IgG抗体的定性或定量检测，还可用于检测所有莱姆氏螺旋菌亚型的感染。
1、用途:本试剂盒用于定性/定量检测血清或血浆中抗莱姆氏IgG抗体,可以检测所有莱姆氏螺旋菌亚型的感染。
2、简介:莱姆病是一种蝉传螺旋体感染性疾病。莱姆病的病原体为莱姆病螺旋体，能引起人类慢性游走性红斑，以及心脏、神经和关节等多系统受累的疾病，对人群健康危害较严重。莱姆病的实验室诊断方法主要是血清学方法。本试剂盒采用特异性莱姆氏螺旋菌三个亚型的混合抗原进行微孔板包被,具有较高的检测灵敏度和特异性。
3、检测原理：采用夹心ELISA方法，将莱姆氏螺旋菌抗原包被于微孔板底部，检测时，稀释样本及试剂盒质控品加入微孔板，样本中的抗莱姆氏螺旋菌IgG抗体与抗原结合，经过孵育，洗涤，加入HRP标记的抗人IgG二抗，在经过孵育，洗涤后加入HRP酶的底物显色剂TMB，终止显色，酶标仪读板，根据标准曲线或者Cutoff值判断样本的阴阳性。
2）在检测开始之前，仔细和完整的阅读说明书，使用试剂盒提供的包装插件的有效版本，确保所有的程序都清楚。
5）遵守好的实验准则和安全指南。穿实验服，带橡皮手套，有必要时请戴护目镜。
6）此试剂盒中含有会伤害眼睛和皮肤的有害试剂。请阅读材料来源和标签获取详细信息。
7）依照国家生物有害于人体健康的物质及安全条例，所有化学药品和准备或使用过的试剂都应当做有害于人体健康的物质进行处理。
9）试剂盒中的所有试剂（包括检测过的人血清/血浆）对HIV/II,HbsAg和HCV都表现为阴性,但是试剂中会出现此类病毒（HIV/II,HbsAg和HCV）或其他具有感染性的病原体的可能性都不能完全被排除.因此,所有的试剂在使用和处理的过程中都应当作潜在生物有害于人体健康的物质进行处理
试剂盒和运输环境和储存环境和温度为2-8℃，避免热源或太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂的准备将在相关章节中阐述。开封的包被板条在三个月内稳定，前提是将包被板条用袋子密封并储存于2-8℃的环境下。
1）样品处理不合理或对实验操作进行任何改动动都会影响实验的结果。取样体积、温育时间、欲处理步骤都必须严格按说明进行。只可以使用标准移液器和标准设备。
2）一旦实验开始，所有的步骤都必须完整的进行下去，不允许中断。把所有试剂和样品都拿到18-25℃的实验室中，在使用前，轻轻摇动液体试剂和样本，试剂混合过程中要避免气泡。
3）请勿接触试剂、移液器、微孔/试管。加试剂和样本时，请使用新的取样吸头，以避免交叉污染。不用的试剂应用盖子盖好，以免重复使用。
5）温育时间会影响实验结果。微孔加样的顺序和时间都必须一致。建议使用8道移液器加样。
6）包被板的清洗很重要，微孔清洗不好将会形成错误的实验结果。建议使用多道移液器或自动微孔清理洗涤设施进行清洗。每次温育间隔期间避免微孔干燥。加洗涤液和吸液时要避免碰到包被孔。清洗和加试剂时都应特别小心。清洗时，在微孔中精确的加入洗涤液缓冲液，同时确保无微孔中无残渣。
7）湿度会影响包被板，所以在未到达室温时请勿打开包装，未使用的包被板要重新密封于装有干燥剂的包装袋中。
10.2.2脑脊液样本:按照Reiber法进行脑脊液检测时,有必要用使血清和脑脊液具有相同的浓度或相同的Cutoff判别范围（OD值为1-0.1）,通过下面方式稀释可以实现:
Cutoff值能够最终靠1:101稀释参数来校正,1:401稀释血清Cutoff值,稀释度乘以4。1:4稀释的脑脊液Cutoff值，稀释度除以25。
1）将标准品、质控品、稀释样本分别100μL加入包被板的微孔中。定性检测只需加入标准品B。
2）盖板，37℃下温育60min。3）弃取微孔内反应液，每孔用300ul的已稀释好的洗涤液洗3次，在吸水纸上将板拍干。
6）弃取微孔内反应液，每孔用300μL的已稀释好的洗涤液洗3次，在吸水纸上将板拍干。
7）若能的线道移液器加底物液和终止液。加底物液和终止液的时间间隔应当相同，使用自动置换型移液器并避免气泡产生。
10）每孔加100ulTMB终止液以终止底物反应。加终止液后，60分钟内在450nm处测OD值（参比波长：600-650nm）
严格按照说明书操作所获得的实验结果才是有效的。使用者必须严格遵守实验室优化管理规定或其他的实验标准。按照质控单的要求，所有的标准品浓度都必须允许范围内。如果其标准不符合标准要求，则实验无效，必须重做。每个实验室应当使用已知浓度的样品做进一步的有效质控。如果实验背离实际结果，应检查以下问题：试剂有效期，贮存条件，取样器，实验设备，温育时间，清洗方法。
在使用前所有试剂和样品均需平衡至室温，所有试剂要充分混合但不要起泡。一旦实验开始，所有步骤都一定要进行到底而不能中断。
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